This procedure is designed to extract DNA from onion in sufficient quantity to be seen.
Cours d'enseignement pratique Anglais/Bio déjà réalisé en 2011. Proposé aux 1ères cette année: 1 séance d'étude et de traduction du protocole, et 1 séance de manipulation.
In this project, you'll learn how to isolate DNA from onion cells, separating it from other cellular components in a manner that still preserves its structure and sequence.
In the end, you'll have enough DNA to see with the unaided eye*, and you'll be able to see its strand-like* structure.
* unaided eye: without a microscope (à l'oeil nu).
*strand-like: a strand = a thread (un fil) / a structure that is like a thread /a strand.
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| A strand-like structure is like this. |
Etude des vidéos en classe: Compréhension Orale.
Videos:
ISOLATION OF DNA FROM ONION
DNA STRUCTURE
Etude du protocole en classe: Compréhension écrite.
Method
YOU WILL NEED:
• 10ml washing-up liquid (the watery type is the best)
• 3g table salt
• 100ml water
• 1 medium-sized onion
• chopping board
• vegetable knife
• 2 jam jars
• 500ml bowl of ice
• blender
• coffee filter (pores of normal filter paper are too small to allow the DNA through)
• 10ml methylated spirits (kept in freezer overnight and in ice until used)
• hair dryer
• funnel
• paper clip/ thin piece of wire
The Procedure:
1: Mix the salt, washing-up liquid and water in one of the jars and stir well to dissolve the salt.
The washing-up liquid breaks down cell membranes, releasing DNA from each nucleus.
2: Peel and chop the onion up finely on the chopping board and add it to the salty washing-up
liquid solution.
3: Place the jar in a large container of boiled water that has been set aside to cool for about 30
minutes. Leave the jar in the water for 15 minutes.
4: Cool the mixture by standing the jar in the bowl of ice for a few minutes.
5: Blend or grind the mixture for no more than 5 seconds. The blender helps to break open the
onion cells but if done for too long it will damage the DNA.
6: Filter the blended mixture through a coffee filter, into another jar using the funnel. This
separates the cell wall material from the DNA and proteins, which are now in solution.
7: Very carefully, holding the jar at a slant, trickle an equal amount of ice-cold methylated spirits
slowly down the side of the jar into the surface of the onion extract, to form a layer on top of the
extract. Leave the jar for a few minutes without disturbing it.
8: The DNA separates from the solution and floats up into the methylated spirits as a film of
threads.
9: Gently scoop out the DNA with a wire - this is easier if you first bend the end of the wire into a
loop.
10: Carefully dry, but do not cook, the DNA with a hair dryer.
Adapted from Rasmussen, A. and Matheson, R. (1990). Sourcebook of Biotechnology Activities,
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Expérience en classe: Expression orale.
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TRAD:
Isolement de l'ADN à partir d'oignonsMéthodeVOUS AUREZ BESOIN DE:• 10ml de liquide vaisselle (assez liquide de préférence)• 3 gr le sel de table• 100ml d'eau• 1 oignon moyen• 1 planche à découper
• Couteau à légumes • 2 pots de confiture• un bol 500ml de glace• Le mélangeur• filtre à café (les trous d'un filtre normal sont le trop petits pour permettre à l'ADN de passer à travers)• 10ml d'alccol méthylé (conservé au congélateur pendant la nuit et dans la glace jusqu'à utilisation) • 1 Sèche-cheveux• 1 entonnoir• 1 trombone / mince morceau de fil de fer
1: Mélanger le sel, liquide vaisselle et d'eau dans l'un des bocaux et bien remuer pour dissoudre le sel.Le liquide vaisselle fait se dissoudre les membranes des cellules, libérant l'ADN de chaque noyau.
2: Pelez et hachez finement l'oignon sur la planche à découper et ajouter le au liquide vaisselle salé.
3: Placez le pot dans un grand récipient d'eau bouillante qui a été mis de côté à refroidir pendant environ 30minutes. Laissez le pot dans l'eau pendant 15 minutes.
4: Refroidir le mélange en se tenant debout le bocal dans le bol de glace pendant quelques minutes.
5: Mélanger ou broyer le mélange 5 secondes pas plus. Le mélangeur permet de casser les cellules d'oignon mais si c'est fait trop longtemps il va endommager l'ADN.
6: Filtrer le mélange à travers un filtre à café, dans un autre pot à l'aide de l'entonnoir.
Ceci sépare les matières des paroies cellulaires de l'ADN et les protéines, qui sont maintenant en train de se dissoudre.
7: Très attentivement, en tenant le pot en position oblique, faites couler une quantité égale glacée d'alcool à brûlerlentement le long du côté du pot dans la surface de l'extrait d'oignon, pour former une couche sur le dessus duextrait. Laissez le pot pendant quelques minutes sans la y toucher.
8: L'ADN se sépare de la solution et des flotteurs jusqu'à dans l'alcool à brûler comme un fil.
9: Extractez délicatement l'ADN avec un fil de fer - c'est plus facile si vous commencez par plier l'extrémité du fil dans uneboucle.
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